簡要描述:TargPurfy AF M1免疫(yi)親(qin)和(he)柱(zhu)(zhu):黃(huang)曲霉毒(du)素(su)(su) M1 免疫(yi)親(qin)和(he)柱(zhu)(zhu),適用于各類基質(zhi)復雜樣品(各種谷物、各類食品、各種飼料(liao))中黃(huang)曲霉毒(du)素(su)(su) M1 的靶向精準提(ti)取凈化(hua)。小柱(zhu)(zhu)中包含一種高(gao)效(xiao)價、高(gao)純度單克隆抗體,對黃(huang)曲霉毒(du)素(su)(su) M1 有特異性選擇(ze)。
詳細介紹
TargPurfy AF M1免疫親和柱
黃曲霉毒素 M1 免疫親和柱,適用于各(ge)(ge)類基質復雜樣品(各(ge)(ge)種谷物、各(ge)(ge)類食品、各(ge)(ge)
種飼料(liao))中黃曲霉毒素 M1 的靶(ba)向精準(zhun)提取凈化。
小(xiao)柱中包(bao)含一種(zhong)高(gao)效價、高(gao)純度單克(ke)隆抗體,對黃(huang)曲霉毒(du)素 M1 有(you)特(te)異(yi)性(xing)選擇。
操作流程(按國(guo)標方法GB 5413.37-2010)
1、樣品提取
1.1 液態乳(ru)、酸(suan)奶樣(yang)品處理
※ 精密稱(cheng)取1g試樣于具塞(sai)離心管(guan)中,加10mL甲醇,渦旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下(xia)離心(xin)10min或過玻璃纖維濾紙;
※ 上清液或(huo)濾液轉移至燒杯中,加40mL水或(huo)PBS稀釋;
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
1.2 乳粉、特殊膳食(shi)用食(shi)品(pin) 樣品(pin)處理
※ 精密(mi)稱取1g樣品,加入(ru)4mL預(yu)熱到50℃的純凈水,渦(wo)旋混勻至乳粉*溶解;
※ 冷卻至20℃后,加(jia)10mL甲醇,渦旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下離心10min或過(guo)玻(bo)璃纖維濾紙;
※ 上清液(ye)或濾液(ye)轉移至燒杯(bei)中,,加40mL水或PBS稀釋;
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
1.3 奶(nai)油 樣品處理(li)
※ 精密稱取1g樣(yang)品(pin)于(yu)離(li)心管中,加入8mL石油醚(mi),待奶(nai)油溶解;
※ 加入9mL水(shui)和11mL甲醇,振蕩30min,將全部液體移至分液漏斗中;
※ 加入0.3g氯化鈉充分(fen)(fen)搖動溶解,靜置分(fen)(fen)層后,取(qu)下層溶液;
※ 旋轉蒸(zheng)發至10mL以(yi)下(xia),用PBS緩沖液(PH=7.4)稀釋至30mL,混(hun)勻(yun);
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
PBS配置:
0.20g KH2PO4+2.92g Na2HPO4•12H2O+8.0g NaCl+0.20gKCl 蒸餾水900mL溶解后,用鹽酸調節(jie)pH=7.4,
再加水定容至1000mL
2、過柱凈化
※ 將50mL SPE空柱管通過SPE轉接頭連接于免疫親和柱上端;
※ 處理好的樣品液以1~2滴/秒的速度通過免疫親和柱,棄掉流出的液體;
※ 用10mL水淋洗免疫親和柱,棄去流出液;
※ 利用真空設備抽干免疫親和柱1min;
※ 用乙腈(或甲醇)2mL×2淋洗免疫親和柱和空(kong)柱管兩(liang)次,收集(ji)全部洗(xi)脫液;
※ 在(zai)50℃氮氣下吹至近干(約100-200μL),用初始流動相定容至1.0mL,渦旋
30s溶解殘留物,0.22/0.45μm濾(lv)膜濾(lv)過,收集續濾(lv)液(ye)上機檢測。
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